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玉米赤霉烯酮免疫親和柱的樣本處理步驟分析

 更新時間:2023-03-13    點擊量:869
  玉米赤霉烯酮免疫親和柱是玉米赤霉菌的代謝產物,具有類雌激素樣作用,具有較強的生殖毒性和致畸作用,可引起動物發生雌激素亢進癥,導致動物不孕或流產,對家禽、豬、牛和羊的影響較大,給畜牧業帶來很大的經濟損失。
 
  玉米赤霉烯酮免疫親和柱的樣本處理步驟:
 
  花生,玉米,大米,小麥及其制品和飼料
 
  1、稱取50g粉碎的樣品于100mL容量瓶中,加入5.0g氯化鈉,以樣品提取液定容;
 
  2、轉移至均質杯中,在均質器上高速攪拌,提取2分鐘;
 
  3、4000r/min離心5min或用定量濾紙過濾
 
  4、取10mL濾液并加入40mLPBS緩沖液稀釋,用玻璃微纖維濾紙過濾,取過濾后液體待測;
 
  5、將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
 
  6、將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;
 
  7、以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次,流速約為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;
 
  8、準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
 
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