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三聚氰胺檢測卡的工作原理:免疫層析技術與抗原抗體反應
更新時間:2025-07-09 點擊量:
35
三聚氰胺檢測卡基于競爭抑制免疫層析技術,通過抗原抗體特異性結合實現快速篩查。其核心原理可分為以下步驟:
1.膠體金標記抗體:信號載體與識別元件
檢測卡中預先將抗三聚氰胺單克隆抗體與膠體金顆粒(直徑20-40nm)結合,形成金標抗體復合物。膠體金顆粒通過靜電作用穩定分散,其表面標記的抗體可特異性識別三聚氰胺分子。例如,深圳后王電子科技有限公司的檢測卡采用高親和力單克隆抗體,確保對三聚氰胺的檢測靈敏度達0.5mg/kg(液態奶)。
2.硝酸纖維素膜固定抗原:檢測線與質控線
在硝酸纖維素膜上,通過噴涂技術固定兩條關鍵線:
檢測線(T線):包被三聚氰胺-載體蛋白偶聯物(如三聚氰胺與牛血清白蛋白結合),作為競爭結合位點。
質控線(C線):包被抗鼠IgG抗體,用于驗證檢測流程有效性。
3.競爭反應:樣本中的三聚氰胺與固定抗原“爭奪”抗體
當樣本(如液態奶、奶粉稀釋液)滴入加樣孔后,通過毛細作用沿膜層析:
陰性樣本:不含三聚氰胺時,金標抗體未被結合,繼續遷移至T線,與固定偶聯物結合形成紅色條帶;同時,部分金標抗體與C線抗鼠IgG結合,顯示第二條紅色條帶。此時T線和C線均顯色,判定為陰性。
陽性樣本:含三聚氰胺時,樣本中的三聚氰胺與金標抗體結合,封閉其抗原結合位點,阻止其與T線偶聯物結合,導致T線不顯色;而C線仍顯色,驗證檢測有效。此時僅C線顯色,判定為陽性。
4.結果判定與靈敏度控制
靈敏度:通過調整金標抗體濃度、T線偶聯物密度及層析速度,實現檢測限優化。例如,智云達檢測卡對液態奶的檢測限為0.5mg/kg,嬰兒奶粉為1mg/kg。
無效判定:若C線未顯色,無論T線如何,均視為檢測卡失效,需重新檢測。
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