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黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒糧油版

簡要描述:黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒糧油版采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中黃曲霉B1的殘留量。定量檢測糧食、植物油等樣品中黃曲霉B1的殘留。

  • 產品型號:黃曲霉B1
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2019-01-23
  • 訪  問  量:984
詳情介紹

一、原理

黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒糧油版采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品黃曲霉B1的殘留量。

二、適用范圍

定量檢測糧食、植物油等樣品中黃曲霉B1的殘留。

、黃曲霉B1ELISA檢測試劑盒糧油版特點及技術指標

* 檢 測 時 間 : 30 min

* 試劑盒靈敏度: 0.03ppb(µg/kg)

* 試劑盒提供工作濃度標準品,使用更方便;

* 試劑盒檢測樣本的靈敏度和準確度:

樣本

檢測下限

回收率

糧油

1.5ppb

70%-120%

試劑盒特異性

藥物名稱

交叉反應率(%)

黃曲霉B1

100%

黃曲霉G1

< 1%

、所需材料

儀器微孔板酶標儀450 nm/630 nm、振蕩器、離心機、刻度移液管(10 mL)洗耳球、天平(感量0.01 g)、離心管(5 mL, 50 mL)、微量移液器:單道 1µL~10 µL、10 µL~100µL、多道 50µL~300µL

試劑:正己烷、甲醇、去離子水

、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

黃曲霉B1酶標板

12×8孔

2

黃曲霉B1標準品濃度*5

5×1mL

3

黃曲霉B1酶標物

7 mL

4

黃曲霉B1抗體

7 mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

黃曲霉B1樣品稀釋液

40 mL

*注:A、B、C、D、E 5個標準品濃度為:0ppb,0.03ppb,0.09ppb,0.27ppb,0.81ppb,A、B標準品各1mL,其余各0.5mL,直接使用。

六:溶液配制

配液1: 洗滌工作液

   用去離子水將20 ×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋。配好的洗滌工作液在4 ℃環境可保存一    個月,用前一天取出回溫。

配液2: 1 ×黃曲霉B1樣品稀釋液        

用去離子水將2 ×黃曲霉B1樣品稀釋液按1:1體積比進行稀釋。配好1 ×黃曲霉B1稀釋液在4℃環境可保存一個月,用前一天取出回溫。

配液3: 樣品提取液

將甲醇與去離子水按V:V=4:1 體積比配制成80%甲醇,即樣品提取液。 

七、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應及時進行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。

② 樣本數目超過8個時推薦使用排槍加樣。

(一)小麥粉、玉米粉、大米、花生、大豆

(稀釋倍數:50倍)

① 稱取粉碎樣品1.0 g ± 0.05 g離心管中,加入 8 mL 樣品提取液(配液3), 震蕩提取1 min

 4000 r / min離心5 min;

③ 小心移取上清液100 μL 加到300μL 1 ×黃曲霉B1稀釋液中, 混勻,取50 μL用于分析

(二)植物油  (稀釋倍數:50)

① 稱取樣品1.0 g ± 0.05 g離心管中,加入4 mL 正己烷,再加入4 mL 樣品提取液(配液3), 震蕩提取1 min;

 4000 r / min離心5 min;

  ③ 小心移取下清液 100 μL 加到400 μL 1 ×黃曲霉B1樣品稀釋液中, 混勻,取50 μL用于分析。

 、 酶標免疫測定程序

  • 將所需試劑從冷藏環境中取出,待其*回  升至室溫(20~25℃)后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  • 按標準品和樣品雙孔平行的數量使用微孔。
  •  加標準品/樣品、酶、抗體:加標準品/樣品50µL到對應的微孔中,加入黃曲霉B1酶標物50µL/孔,再加入黃曲霉B1抗體50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃環境中反應20min。
  •  洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,

加入洗滌工作液250µL/孔,每次靜置20s,甩去孔內液體,重復洗滌3次,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

  •  顯色:加入底物液A液50µL/孔,再加底物    

液B液50µL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環境中反應10min

  •  測定:加入終止液50µL/孔,用酶標儀立即  測定450nm處的吸光度值(建議用雙波長450/630nm)檢測。

、 結果判定

以標準品百分吸光率為縱坐標,以黃曲霉B1標準品濃度(ppb)的半對數為橫坐標,繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中黃曲霉B1實際濃度。(詳見試劑盒專業分析軟件,以便進行大量樣本的分析計算。)

、 注意事項

洗板拍干后應立即進行下一步操作

反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。

不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。

④ 0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。

⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為10~15min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到20min,反之則減短反應時間。

 未提及樣本請致電本公司技術服務部。

十一貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

保 質 期: 12個月

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